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  • 产品名称:50T轮状病毒B组PCR检测试剂盒

  • 产品型号:BH-P63410
  • 产品**:博湖
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简单介绍:
50T轮状病毒B组PCR检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
详情介绍:

它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

50T轮状病毒B组PCR检测试剂盒

50T

BH-P63410

实验方法步骤:

方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(*好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA试剂盒  PTP/PTPase/CD148 ELISA Kit  杀肽B/天蚕抗肽肽B抗体英文名称:Cecropin B 0.2ml

蛋白酪氨酸激酶(PTK/CD115)ELISA试剂盒  PTK/CD115 ELISA Kit  碳酸酐酶13抗体英文名称:CA13 0.2ml

蛋白酪氨酸激酶(PTK)ELISA试剂盒  PTK ELISA Kit  氯离子通道蛋白5抗体英文名称:Chloride Channel 5 0.1ml

蛋白聚糖4(PRG4)ELISA试剂盒  PRG4 ELISA Kit  轴突相关粘附分子抗体英文名称:Contactin 4 + 6 0.2ml

蛋白聚糖(PG)ELISA试剂盒  PG ELISA Kit  卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD1抗体英文名称:CHCHD1 0.1ml

蛋白精氨酸脱亚氨酶4(PADI4)ELISA试剂盒  PADI4 ELISA Kit  ATP依赖的解旋酶CHD3抗体英文名称:CHD3 0.2ml

蛋白精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)ELISA试剂盒  PRMT1 ELISA Kit  碳酸酐酶7抗体英文名称:CA7 0.2ml

蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒  PKC ELISA Kit  胶原蛋白和钙结合表皮生长因子结构域1抗体英文名称:CCBE1 0.2ml

蛋白激酶C beta II(PKC-bII)ELISA试剂盒  PKC-bII ELISA Kit  卷曲螺旋结构域蛋白102B抗体英文名称:CCDC102B 0.2ml

蛋白激酶B(PKB)ELISA试剂盒  PKB ELISA Kit  卷曲螺旋结构域蛋白16抗体英文名称:CCDC16 0.2ml

蛋白激酶A(PKA)ELISA试剂盒  PKA ELISA Kit  细胞色素B还原酶1抗体英文名称:CYBR1 0.2ml

蛋白基因产物9.5(PGP 9.5)ELISA试剂盒  PGP 9.5 ELISA Kit  2号染色体开放阅读框76抗体英文名称:C2orf76 0.2ml

蛋白二硫化物异构酶前体(PDI)ELISA试剂盒  PDI ELISA Kit  3号染色体开放阅读框19抗体英文名称:C3orf19 0.2ml

蛋白Z(Protein Z)ELISA试剂盒  Protein Z ELISA Kit  卷曲螺旋结构域蛋白60抗体英文名称:CCDC60 0.2ml

蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3)ELISA试剂盒  PDIA3 ELISA Kit  细胞色素c氧化酶5A抗体英文名称:COX5A 0.2ml

50T轮状病毒B组PCR检测试剂盒250mL 固相RNa剂 Surface RNase Erasol 常温

120mL 气相RNase剂 Air RNase Erasol 常温

1.5mL 液相RNas剂 Solution RNase Erasol -20℃保存

10mL 氧钒核糖核苷复合物(RVC ),0.2M Ribonucleoside Vanadyl Complex -20℃保存

1.5mL RNA长效保存液 RNASAVER -20℃保存

400U RNase抑制剂(人源) Human RNase Inhibitor -20℃保存

2500U RNase抑制剂(人源) Human RNase Inhibitor -20℃保存

3000U RNase抑制剂(小鼠源) Murine RNase Inhibitor -20℃保存

500U RNase抑制剂(猪源)  

1.5mL 非酶DNA剂 DNA Erasol 4℃保存

15次 非酶DNA剂-2 DNA Erasol-2 4℃保存

50次 柱式DNA剂 Column DNA Erasol 4℃保存

5次 大提柱式DNA剂 Maxi Column DNA Erasol 溶液A需4℃保存,其余可以室温保存

 


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