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产品详情
  • 产品名称:50T土拉弗朗西斯菌PCR检测试剂盒

  • 产品型号:BH-P63778
  • 产品厂商:博湖
  • 产品文档:
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简单介绍:
50T土拉弗朗西斯菌PCR检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
详情介绍:


它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

50T土拉弗朗西斯菌PCR检测试剂盒

50T

BH-P63778

实验方法步骤:

方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(*好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
角蛋白20(KRT20)ELISA试剂盒  KRT20 ELISA Kit  颗粒酶A抗体英文名称:GZMA/Granzyme A 0.1ml

角蛋白2(KRT2)ELISA试剂盒  KRT2 ELISA Kit  颗粒酶D/B/E/N/G/F/H抗体英文名称:Granzyme D/B/E/N/G/F/H 0.1ml

角蛋白19(KRT19)ELISA试剂盒  KRT19 ELISA Kit  粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子3受体抗体英文名称:G-CSFR/CD114/GCSF Receptor 0.1ml

角蛋白18(KRT18)ELISA试剂盒  KRT18 ELISA Kit  血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗体英文名称:GPA/GYPA/CD235a 0.1ml

角蛋白17(KRT17)ELISA试剂盒  KRT17 ELISA Kit  G蛋白修补结构域蛋白3抗体英文名称:GPATCH3 0.2ml

角蛋白16(KRT16)ELISA试剂盒  KRT16 ELISA Kit  G蛋白偶联受体GPR63蛋白抗体英文名称:GPR63 0.2ml

角蛋白15(KRT15)ELISA试剂盒  KRT15 ELISA Kit  磷酸化珠蛋白转录因子1抗体英文名称:phospho-GATA1(Ser161) 0.1ml

角蛋白14(KRT14)ELISA试剂盒  KRT14 ELISA Kit  G蛋白偶联受体109A抗体英文名称:GPR109A 0.1ml

角蛋白13(KRT13)ELISA试剂盒  KRT13 ELISA Kit  G蛋白偶联受体15抗体英文名称:GPR15 0.1ml

角蛋白12(KRT12)ELISA试剂盒  KRT12 ELISA Kit  粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体β抗体英文名称:IL3RB 0.1ml

角蛋白10(KRT10)ELISA试剂盒  KRT10 ELISA Kit  生长停滞特异性蛋白8抗体英文名称:GAS8 0.2ml

角蛋白1(KRT1)ELISA试剂盒  KRT1 ELISA Kit  G蛋白偶联受体GPR135蛋白抗体英文名称:GPR135 0.2ml

焦磷酸酶2(PPA2)ELISA试剂盒  PPA2 ELISA Kit  磷脂?;嫉鞍拙厶?5抗体英文名称:Glypican 5 0.2ml

胶质细胞系来源神经营养因子受体α1(GFRα1)ELISA试剂盒  GFRα1 ELISA Kit  GTP结合蛋白4抗体(慢性肾功能衰竭蛋白)英文名称:GTPBP4 0.2ml

焦磷酸酶1(PPA1)ELISA试剂盒  PPA1 ELISA Kit  GADD45γ相互作用蛋白1抗体英文名称:GADD45GIP1 0.2ml

50T土拉弗朗西斯菌PCR检测试剂盒1瓶 MEL细胞株 MEL 低温运输和保存

1瓶 MFC-GFP细胞株 MFC-GFP 低温运输和保存

1瓶 MFC细胞株 MFC 低温运输和保存

1瓶 MG-63细胞株 MG-63 低温运输和保存

1瓶 MGC-803细胞株 MGC-803 低温运输和保存

1瓶 MKN-28细胞株 MKN-28 低温运输和保存

1瓶 MKN45细胞株 MKN45 低温运输和保存

1瓶 MLTC-1细胞株 MLTC-1 低温运输和保存

1瓶 MMQ细胞株 MMQ 低温运输和保存

1瓶 MNNG/HOSCl#5 [R-1059-D]细胞株 MNNG/HOSCl#5 [R-1059-D] 低温运输和保存

1瓶 MOLM-13细胞株 MOLM-13 低温运输和保存

1瓶 MOLT-4细胞株 MOLT-4 低温运输和保存

1瓶 Mouse podocyte(含 tsSV40T 序列)细胞株 Mouse podocyte(含 tsSV40T 序列) 低温运输和保存

 



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