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  • 产品名称:50T脑心肌炎病毒(EMCV)PCR检测试剂盒

  • 产品型号:BH-P63892
  • 产品**:博湖
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简单介绍:
50T脑心肌炎病毒(EMCV)PCR检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
详情介绍:

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

50T脑心肌炎病毒(EMCV)PCR检测试剂盒

50T

BH-P63892

它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。


实验方法步骤:

方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(*好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
Twist转录因子(TWIST)ELISA试剂盒  TWIST ELISA Kit  ING4抗体英文名称:ING4 0.2ml

Twist邻位子(TWISTNB)ELISA试剂盒  TWISTNB ELISA Kit  大鼠血清型IgA抗体英文名称:rat IgA 0.2ml

Tsukushin蛋白(TSK)ELISA试剂盒  TSK ELISA Kit  白介素-17F抗体英文名称:MDA7/IL-24/IL-17F 0.2ml

tRNA异戊基转移酶1(TRIT1)ELISA试剂盒  TRIT1 ELISA Kit  胰岛素生长因子样家族成员1抗体英文名称:IGFL1 0.2ml

tRNA磷酸转移酶1(TRPT1)ELISA试剂盒  TRPT1 ELISA Kit  白介素-17C抗体英文名称:IL-17C 0.1ml

Trihydrophobin1蛋白(TH1)ELISA试剂盒  TH1 ELISA Kit  中介素抗体英文名称:ADM2 0.1ml

Tricellulin蛋白(TRIC)ELISA试剂盒  TRIC ELISA Kit  NF-kappa-B抑制子beta抗体英文名称:IkB beta 0.1ml

TOPBP1相互作用复制刺激蛋白(Treslin)ELISA试剂盒  Treslin ELISA Kit  干扰素调节因子6抗体英文名称:IRF6 0.1ml

Tomoregulin1蛋白(TR1)ELISA试剂盒  TR1 ELISA Kit  胰岛素生长因子样家族成员4抗体英文名称:IGFL4 0.2ml

Tomoregulin蛋白(TR)ELISA试剂盒  TR ELISA Kit  白细胞介素31抗体英文名称:IL-31 0.2ml

Toll样受体衔接分子1(TICAM1)ELISA试剂盒  TICAM1 ELISA Kit  干扰素诱导蛋白P78抗体英文名称:IFI78 0.2ml

Toll样受体9(TLR9)ELISA试剂盒  TLR9 ELISA Kit  抑制素α/Inhibin α抗体英文名称:Inhibin Alpha 0.1ml

Toll样受体8(TLR8)ELISA试剂盒  TLR8 ELISA Kit  白介素18抗体英文名称:IL-18 0.1ml

Tolloid样蛋白1(TLL1)ELISA试剂盒  TLL1 ELISA Kit  核蛋白4抗体(Ran结合蛋白4)英文名称:Importin4 0.2ml

Toll样受体10(TLR10)ELISA试剂盒  TLR10 ELISA Kit  真核翻译起始因子4E抗体英文名称:eIF4E 0.1ml

50T脑心肌炎病毒(EMCV)PCR检测试剂盒2 ug pSUPER-puro pSUPER-puro 低温运输,-20℃保存

2 ug pSUPER-retro-EGFP pSUPER-retro-EGFP 低温运输,-20℃保存

2 ug pSV-beta-gal pSV-beta-gal 低温运输,-20℃保存

2 ug pSV2718 pSV2718 低温运输,-20℃保存

2 ug pSV2neo pSV2neo 低温运输,-20℃保存

2 ug pSV-beta-galactosidase pSV-beta-galactosidase 低温运输,-20℃保存

2 ug pSV3neo pSV3neo 低温运输,-20℃保存

2 ug pSwitch pSwitch 低温运输,-20℃保存

2 ug PT2/GFP PT2/GFP 低温运输,-20℃保存

2 ug PT2-HB PT2-HB 低温运输,-20℃保存

2 ug PT2/mCherry PT2/mCherry 低温运输,-20℃保存

2 ug PT2-Puro PT2-Puro 低温运输,-20℃保存

2 ug PT2/RMCE-puDTK PT2/RMCE-puDTK 低温运输,-20℃保存

注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

 


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