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  • 产品名称:50T口蹄疫O型/Asia1型(FMDV-O/-Asia1)PCR检测试剂盒

  • 产品型号:BH-P64164
  • 产品**:博湖
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简单介绍:
50T口蹄疫O型/Asia1型(FMDV-O/-Asia1)PCR检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
详情介绍:

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

50T口蹄疫O型/Asia1型(FMDV-O/-Asia1)PCR检测试剂盒

50T

BH-P64164

它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。


实验方法步骤:

方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(*好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
甲状腺素结合球蛋白抗体英文名称:Thyroxine Binding Globulin 0.2ml

  转导素β1X连锁蛋白抗体英文名称:TBL1X 0.2ml

  内皮素B受体抗体英文名称:Endothelin B Receptor 0.1ml

  转导素β1X连锁受体蛋白1抗体英文名称:TBLR1 0.2ml

  甲状腺受体相关蛋白220抗体英文名称:TRAP220 0.2ml

  磷酸化甲状腺受体相关蛋白220抗体英文名称:phospho-TRAP220(Thr1457)  0.1ml

  抑癌基因5抗体英文名称:TUSC5 0.2ml

  脑抑癌蛋白1抗体英文名称:Tomoregulin-1 0.2ml

  肺癌抑癌蛋白1抗体英文名称:TUSC1 0.2ml

  前列腺癌抑癌蛋白3抗体英文名称:TUSC3 0.2ml

  甲状腺受体α1抗体英文名称:THRA1 0.2ml

  甲状腺受体α1+α2抗体英文名称:THRA1+2 0.2ml

  脂滴相关蛋白TIP47抗体英文名称:TIP47 0.2ml

  血管内皮标记相关蛋白质7抗体英文名称:TEM7R 0.2ml

  抑制基因Testin抗体英文名称:Testin 0.2ml

50T口蹄疫O型/Asia1型(FMDV-O/-Asia1)PCR检测试剂盒龙胆紫血液琼脂基础 Crystal violet blood agar base 250g

PNB(对硝基苯甲酸)  1.0g

TCH(噻吩-2-羧酸酰肼)  0.1g

戊烷脒多粘素B琼脂基础 Pentane Amidines polymyxin B agar base 250g

碳酸氢钠琼脂基础 NaHCO3 Agar Base 250g

指示选择性培养基基础 Direct selective medium-based 250g

青霉素敏感纸片 Penicillin-sensitive paper 20片

碘伏(液体) Povidone-iodine (liquid) 500g

MiddleBrook7H10琼脂 MiddleBrook7H10 Agar 250g

MiddleBrook7H11琼脂 Middle Brook 7H11 Agar 250g

精氨酸肉汤 Arginine Broth acc. To Schubert 250g

曲霉素琼脂基础(AFPA) AFPA 250g

假单胞分离琼脂 Pseudomonas Isolation Agar 250g

注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

 


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