VCAP人前列腺癌细胞

英文名称	VCAP:VCAP	产品形态	上皮细胞样 贴壁细胞
货号	P-X1014	产品分类	人细胞系
规格	1×106	包装	株
来源	器官：前列腺；组织：脊椎转移；：癌	用途	仅供科研研究使用

细胞特性：

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

生长培养基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

推荐传代比例 1:2-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

注意事项 该细胞贴壁疏松，影响细胞生长，建议使用多聚-L-赖氨酸溶液包被培养瓶后进行培养，请提前准备多聚-L-赖氨酸溶液（货号 PB180523）。

背景描述 VCaP细胞是于1997年从一位不受激su影响的前列腺癌患者脊椎转移灶中建立的细胞株。VCaP细胞先在小鼠中进行异种移植传代，随后进行体外培养；体内及体外VCaP细胞都对雄性激su敏感。近发现，前列腺癌细胞Vcap细胞在异种移植到小鼠时可能需要小鼠亲异逆转录病毒Bxv-1。

年龄（性别） 男

组织来源 器官：前列腺；组织：脊椎转移；：癌

细胞类型 肿瘤细胞

肿瘤类型 前列腺癌细胞

生物等级 2

倍增时间 ~53-144 hours

致瘤性 Yes, in nude and SCID mice.

抗原表达情况 cytokeratin-18; Homo sapiens, expressedp53 antigen; Homo sapiens, expressedprostate specific antigen (PSA); Homo sapiens, expressedprostatic acid phosphatase (PAP); Homo sapiens, expressedRb protein; Homo sapiens, expressed

基因表达情况 cytokeratin-18; Homo sapiens, expressed, p53 antigen; Homo sapiens, expressed, prostate specific antigen (PSA); Homo sapiens, expressed, prostatic acid phosphatase (PAP); Homo sapiens, expressed, Rb protein; Homo sapiens, expressed

保藏机构 ATCC; CRL-2876 ECACC; 06020201

干冰运输及复苏好存活细胞

细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代 。                      
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备MEM（推荐iCell-0012）培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二、细胞培养操作:

1) 复苏细胞：将含有 1 mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 4 mL 培养基混 合均匀。在 1000 rpm 条件下离心 3 min，弃去上清液，加 1-2 mL 培养基后吹匀。然后将所有 细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜 (或将细胞悬液加入 6 cm 皿中，加入约 4 mL 培养基，培养过夜) 。天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
b、加 1 mL 消化液 (0.25%Trypsin-0.53mM EDTA) 于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去 消化液，将培养瓶置于 37℃培养箱中消化 1 -3min (视细胞消化情况而定) ，然后在显微镜下 观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。        。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞，装入无菌离心管中，1000 rpm 条件下离心 4 min，弃去上清液， 用 PBS 清洗一遍，弃尽 PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度 5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻 存管冻存 1mL 细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h 后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
三、培养注意事项:

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。 
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。 
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。 
4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，，用新鲜的完全培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。 
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。 
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 
7. 该细胞仅供科研使用。 
8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议 1：2 传代 。 
9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

公司正在出售的产品：

猴超敏C反应蛋白(hs-CRP)elisa分析检测试剂盒	NADPH氧化酶活化蛋白1抗体
hs-CRP ELISA Kit	血栓素B2抗体(一种新发现的抑癌基因)  Anti-TBX2/T-box2
人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)elisa分析检测试剂盒	GTF3C3/TFIIIC102
UGT2B4ELISAKit	通用转录因子3C多肽3/TFIIIC102抗体
多囊肾蛋白1抗体  Anti-Polycystin 1	NOXA2
蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗体  Anti-PTPN6/SHP1	Phospho-PDGFRA (Tyr1018)
分泌性磷蛋白24抗体  Anti-SPP24/SPP2	嗅觉受体5D16抗体
磷酸化血小板源性生长因子受体-α抗体	OR5D16
大鼠α烯醇化酶(α-enolase)elisa分析检测试剂盒	DNA损伤修复酶ERCC3蛋白抗体  Anti-XPB/ERCC3
Rat α-enolase ELISA Kit	神经降压素受体1抗体  Anti-NTR1/Neurotensin Receptor 1
人核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)elisa分析检测试剂盒	RFTN2蛋白抗体  Anti-RFTN2
AFA/snoRNP/U3RNPELISAKit	STRN4蛋白抗体  Anti-Striatin 4/zinedin
乙型流感HA elisa分析检测试剂盒	组织磷酸二酯酶5（PDE5）活性荧光定量检测试剂盒
大鼠角化细胞生长因子(KGF)elisa分析检测试剂盒	VCAP人前列腺癌细胞人生长释放肽（Ghrelin）elisa检测试剂盒
LIP5抗体	细胞分裂相关蛋白CSTF64抗体
LIP5	CstF-64