注意事项：

①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

②使用干净的塑料容器配置洗涤液。

③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。

⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。

需自备的仪器和用品：

高效液相色谱仪、示差折光检测器、低速离心机、溶剂抽滤装置、超声波清洗器、针头式过滤器（水系，50个，0.22μm）、滤膜（水系1个，0.45μm）、

钙柱（Carbomix Ca-NP10，7.8 ×300 mm）、可调式移液器、样品瓶（50个，2mL）、超纯水。

优点如下：

1、快速简便：操作时间短，48-50T，可测40例样本左右，96-100T,可测80例样本左右；

2、取样量微：常规操作取样量50l， 酶标仪操作仅需5l即可检测，部分试剂盒取样多少请；

3、稳定性好：试剂盒2～8℃存放3个月有效；

4、再现性好：20倍稀释线性仍然良好；

5、回收试验： X =99%；

6、受外界影响因素?。焊扇乓蛩厣?，重复性强；

7、测试面广：可测动物血清(浆)、组织、各种体液、灌流液、各种培养细胞以及细胞培养上清液等，部分试剂盒适用于检测植物。

测定步骤：

1.加样

1. 除包被外都需45度加样

2.加样体积要准确

3.管底加样，不能加在管壁上

4.加样时不能产生气泡

2.温浴

1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。

2.各ELISA板不应叠在一起。

3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。

4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。

3.洗涤

1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。

2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。

4.读板

1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。

2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。

优点如下：

1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。

2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。

3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。

4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。

5、再现性好：变异系数CV=1.7%。

6、回收试验： X =103.3%。

7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。

8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。

艾格琼脂 Eugonic Agar 250g　人接触蛋白1(Contactin-1)ELISA试剂盒 31.2-2000 pg/mL

TM培养基 Thayer Martin Agar 250g　ELISA Kit for Human Contactin-1 31.2-2000 pg/mL

YNB培养基 YNB Medium 100g　人软骨蛋白(Chondroadherin)ELISA试剂盒 0.312-20 ng/mL

硫培养基 Medium-sulfur bacteria 250g　ELISA Kit for Human Chondroadherin 0.312-20 ng/mL

改良frey氏培养基 Modified Frey Medium 250g　人补体C1s亚成分(Complement C1s subcomponent)ELISA试剂盒 15.6-1000 pg/mL

肉汤培养基(测磷数)  250g　ELISA Kit for Human Complement C1s subcomponent 15.6-1000 pg/mL

解磷培养基 Norganic Phosphorus Bacteria 250g　人补体成分C8β链(C8G)ELISA试剂盒 0.312-20 ng/mL

缺陷假单胞培养液（SLB肉汤） SLB Broth 250　ELISA Kit for Human Complement component C8 gamma chain 0.312-20 ng/mL

吡哆醇Y培养基 Pyridoxine Y medium 250g　人碳酸酐酶3(Carbonic anhydrase 3)ELISA试剂盒 0.078-5 ng/mL

假单胞cfc选择性培养基 Pseudomonas CFC Selective Agar 250g　ELISA Kit for Human Carbonic anhydrase 3 0.078-5 ng/mL

可溶性淀粉培养基 Soluble Starch Medium 250g　人补体成分9(C9)ELISA试剂盒 15.6-1000 pg/mL

AK琼脂（2号） AK Agar（No.2） 250g　ELISA Kit for Human Complement component C9 15.6-1000 pg/mL

牛肝颗粒  100g　人C1q TNF相关蛋白-1(CTRP1/C1QTNF1)ELISA试剂盒 62.5-4000 pg/mL

多酚氧化酶PPO测试盒PI 3 Kinase p85 beta  磷脂酰肌醇激酶p85β抗体规格: 0.1ml

phospho-PIK3R2(Tyr467)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶p85β抗体规格: 0.1ml

PIWIL1/Miwi  piwi样1蛋白抗体规格: 0.1ml

Piwil2/Mili  piwi样2蛋白抗体规格: 0.2ml

PCK1  磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗体规格: 0.2ml

PCK2  磷酸羧化酶2抗体规格: 0.2ml

PKA/PKAcat/PKACB  蛋白激酶A抗体规格: 0.1ml

Phospho-PRKACB(Thr198)  磷酸化蛋白激酶C亚性抗体规格: 0.1ml

PKA C alpha+beta  蛋白激酶C抗体规格: 0.1ml

phospho-PKA beta(Ser338)  磷酸化蛋白激酶Aβ抗体规格: 0.1ml

PKA gamma  蛋白激酶Aγ抗体规格: 0.2ml

PKA R2/PKA IIα  蛋白激酶A受体2α亚基抗体规格: 0.2ml

phospho-PKA R2 (Ser96)  磷酸化蛋白激酶A受体2α亚基抗体规格: 0.1ml