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抗体的制备流程

日期:2024-08-28 02:46
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摘要: 抗体的制备流程: 1. 免yi 原的制备 普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免yi 原。 小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免yi 原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。 2. 免yi 动物 常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。 3. 免yi 血清的收集 一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、...

抗体的制备流程:

1. 免yi 原的制备

普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免yi 原。

小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免yi 原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。

2. 免yi 动物

常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。

3. 免yi 血清的收集

一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。

4. 免yi 血清的纯化与鉴定

得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。

5. 免yi 血清的保存

建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经chu菌并添加防腐剂。