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引物纯度和稳定性分析

日期:2024-08-27 23:17
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摘要: 引物纯度和稳定性分析如下: 定制引物的标准纯度对于大多数PCR应用是足够的。因脱盐而除去的苯甲?;鸵於□;苌?,因此不会干扰PCR。部分应用需要纯化,以除去在合成过程中的任何非全长序列。这些截断序列的产生是因为DNA合成化学的效率不是100%。这是个循环过程,在每个碱基加入时使用重复化学反应,使DNA从3'到5'合成。在任何一个循环都可能失败。较长的引物,尤其是大于50个碱基,截断序列的比例很大,可能需要纯化。 引物产量受合成化学的效率及纯化方法的影响。定制引物以干粉形式运输。zui 好在TE重溶...

引物纯度和稳定性分析如下:

  定制引物的标准纯度对于大多数PCR应用是足够的。因脱盐而除去的苯甲酰基和异丁?;苌伲虼瞬换岣扇臥CR。部分应用需要纯化,以除去在合成过程中的任何非全长序列。这些截断序列的产生是因为DNA合成化学的效率不是100%。这是个循环过程,在每个碱基加入时使用重复化学反应,使DNA从3'到5'合成。在任何一个循环都可能失败。较长的引物,尤其是大于50个碱基,截断序列的比例很大,可能需要纯化。  

  引物产量受合成化学的效率及纯化方法的影响。定制引物以干粉形式运输。zui 好在TE重溶引物,使其zui 终浓度为100μM。TE比去离子水好,因为水的pH经常偏酸,会引起寡核苷的水解。


  引物的稳定性依赖于储存条件。应将干粉和溶解的引物储存在-20℃。以大于10μM浓度溶于TE的引物在-20℃可以稳定保存6个月,但在室温(15℃到30℃)仅能保存不到1周。干粉引物可以在-20℃保存至少1年,在室温(15℃到30℃)zui 多可以保存2个月。