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  • 产品名称:50T解脲脲原体PCR检测试剂盒

  • 产品型号:BH-P63732
  • 产品**:博湖
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简单介绍:
50T解脲脲原体PCR检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
详情介绍:

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

50T解脲脲原体PCR检测试剂盒

50T

BH-P63732

它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。


实验方法步骤:

方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(*好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
鸟氨酸转氨酶(OAT)ELISA试剂盒  OAT ELISA Kit  FBXO28蛋白抗体英文名称:FBXO28 0.2ml

鸟氨酸脱羧酶抗酶1(OAZ1)ELISA试剂盒  OAZ1 ELISA Kit  FBXW5蛋白抗体英文名称:FBXW5 0.2ml

黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM1)ELISA试剂盒  MAdCAM1 ELISA Kit  FBXW12蛋白抗体英文名称:FBXW12 0.2ml

黏病毒耐药蛋白2(MX2)ELISA试剂盒  MX2 ELISA Kit  FBXO42蛋白抗体英文名称:FBXO42 0.2ml

黏病毒耐药蛋白1(MX1)ELISA试剂盒  MX1 ELISA Kit  FasL抗体英文名称:Fas Ligand 0.1ml

尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶5(NOX5)ELISA试剂盒  NOX5 ELISA Kit  原纤维蛋白1抗体英文名称:Fibrillin 1 0.2ml

尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)ELISA试剂盒  NOX4 ELISA Kit  胰腺衍生因子抗体英文名称:FAM3B/PANDER 0.2ml

尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)ELISA试剂盒  NOX1 ELISA Kit  酸性成纤维细胞生长因子抗体英文名称:FGF1 0.1ml

尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)ELISA试剂盒  NNMT ELISA Kit  凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相关抗原抗体英文名称:factor VIII 0.1ml

内质网核心信号1(ERN1)ELISA试剂盒  ERN1 ELISA Kit  凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相关抗原抗体英文名称:factor VIII 0.1ml

内质网氨肽酶2(ERAP2)ELISA试剂盒  ERAP2 ELISA Kit  Fas死亡结构域相关蛋白英文名称:FADD 0.1ml

内脂素(VF)ELISA试剂盒  VF ELISA Kit  胰腺衍生因子抗体英文名称:FAM3A 0.1ml

内粘蛋白(EMCN)ELISA试剂盒  EMCN ELISA Kit  补体因子H抗体英文名称:Factor H 0.1ml

内酰胺酶β2(LACTβ2)ELISA试剂盒  LACTβ2 ELISA Kit  Fas相关1因子抗体英文名称:FAF1 0.1ml

内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制因子(Vaspin)ELISA试剂盒  Vaspin ELISA Kit  磷酸化Fas死亡结构域相关蛋白抗体英文名称:phospho-FADD (Ser194) 0.1ml

50T解脲脲原体PCR检测试剂盒5g ?;撬?Taurine  室温保存

25g 牛胆酸钠 Taurocholic Acid Sodium Salt 室温干燥保存

1g ?;撬嵬蜒醯ㄋ崮?Taurodeoxycholic Acid Sodium 室温保存

5g β- 硫代酸 TBA(2-Thiobarbituric Acid) 密封干燥保存

5g N- 三 ( 羟甲基 ) 甲基 -2- 氨基乙烷磺酸 TES, Free Acid 室温保存

5g 盐酸四环素 Tetracycline Hydrochloride 室温干燥保存

1g 3,3’,5,5’- 四甲基联苯胺二盐酸 3,3’,5,5’-Tetramethyl Benzidine Dihydrochloride (TMB 2HCl) 4-8℃保存

100mL 三氟乙酸 TFA(Trifluoroacetic Acid) 室温保存

250mg 噻唑兰 Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide(MTT)  4℃避光保存

25mg 噻苯隆 Thidiazuron(TDZ) 室温干燥保存

25g 硫脲 Thiourea 室温保存

25g L- 苏氨酸 L-Threonine 室温干燥保存

1000U 凝血酶 Thrombin From Bovine Plasma -20℃保存

注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

 


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