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  • 产品名称:50T猪蓝耳病病毒通用型(PRRSV-U)PCR检测试剂盒

  • 产品型号:BH-P63882
  • 产品**:博湖
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简单介绍:
50T猪蓝耳病病毒通用型(PRRSV-U)PCR检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
详情介绍:

它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

50T猪蓝耳病病毒通用型(PRRSV-U)PCR检测试剂盒

50T

BH-P63882

实验方法步骤:

方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(*好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。

注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
白介素17D(IL17D)ELISA试剂盒  IL17D ELISA Kit  干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白3抗体英文名称:IFIT3 0.2ml

白介素17C(IL17C)ELISA试剂盒  IL17C ELISA Kit  干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白5抗体英文名称:IFIT5 0.2ml

白介素17(IL17)ELISA试剂盒  IL17 ELISA Kit  干扰素诱导跨膜蛋白2抗体英文名称:IFITM2 0.2ml

白介素16(IL16)ELISA试剂盒  IL16 ELISA Kit  干扰素诱导跨膜蛋白5抗体英文名称:IFITM5 0.2ml

白介素15(IL15)ELISA试剂盒  IL15 ELISA Kit  干扰素alpha/beta 受体1蛋白抗体英文名称:phospho-IFNAR1(Tyr466)  0.1ml

白介素13(IL13)ELISA试剂盒  IL13 ELISA Kit  干扰素gamma受体1蛋白抗体英文名称:phospho-IFNGR1 (Tyr457) 0.1ml

白介素12受体β2(IL2Rβ2)ELISA试剂盒  IL2Rβ2 ELISA Kit  真核翻译起始因子3亚基L蛋白抗体英文名称:IF3EI  0.2ml

白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒  IL12B ELISA Kit  干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白2抗体英文名称:IFIT2 0.2ml

白介素12A(IL12A)ELISA试剂盒  IL12A ELISA Kit  干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白1B抗体英文名称:IFIT1B  0.2ml

白介素12(IL12)ELISA试剂盒  IL12 ELISA Kit  160kDa内含子结合蛋白抗体英文名称:IBP160 0.2ml

白介素11受体α(IL11Rα)ELISA试剂盒  IL11Rα ELISA Kit  Bruton酪氨酸激酶抑制剂蛋白抗体英文名称:IBTK 0.2ml

白介素11(IL11)ELISA试剂盒  IL11 ELISA Kit  γ干扰素诱导蛋白IP30抗体英文名称:IFI30 0.2ml

白介素10受体α(IL10Rα)ELISA试剂盒  IL10Rα ELISA Kit  中间丝家族孤啡肽1蛋白抗体英文名称:IFFO 0.2ml

白喉素合酶(DPH5)ELISA试剂盒  DPH5 ELISA Kit  胰岛素受体β抗体英文名称:Insulin receptor subunit beta 0.1ml

白介素10(IL10)ELISA试剂盒  IL10 ELISA Kit  内脏器官发育转位相关蛋白NPH2抗体英文名称:Inversin 0.2ml

50T猪蓝耳病病毒通用型(PRRSV-U)PCR检测试剂盒2 ug pRAV-flag pRAV-flag 低温运输,-20℃保存

2 ug pBaBe-puro pBaBe-puro 低温运输,-20℃保存

2 ug pRC pRC 低温运输,-20℃保存

2 ug pRC/CMV pRC/CMV 低温运输,-20℃保存

2 ug pRetro-Off pRetro-Off 低温运输,-20℃保存

2 ug pRetro-On pRetro-On 低温运输,-20℃保存

2 ug pRetro-on-EGFP pRetro-on-EGFP 低温运输,-20℃保存

2 ug pRetro-on-RFP pRetro-on-RFP 低温运输,-20℃保存

2 ug pRetroX-IRES-DsRedExpress pRetroX-IRES-DsRedExpress 低温运输,-20℃保存

2 ug pRetroX-IRES-ZsGreen1 pRetroX-IRES-ZsGreen1 低温运输,-20℃保存

2 ug pREV pREV 低温运输,-20℃保存

2 ug pRevTet-Off pRevTet-Off 低温运输,-20℃保存

2 ug pRevTet-On pRevTet-On 低温运输,-20℃保存

 


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