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  • 产品名称:50T黄热病毒(YFV)PCR检测试剂盒

  • 产品型号:BH-P64080
  • 产品**:博湖
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简单介绍:
50T黄热病毒(YFV)PCR检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
详情介绍:

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

50T黄热病毒(YFV)PCR检测试剂盒

50T

BH-P64080

它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。


实验方法步骤:

方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(*好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
磷脂酰丝氨酸脱羧酶PISD抗体英文名称:PISD 0.2ml

  patatin样磷脂酶1抗体英文名称:PNPLA1 0.2ml

  早幼粒细胞白血病蛋白抗体英文名称:PML 0.2ml

  酪酪肽抗体英文名称:Peptide YY/PYY 0.2ml

  麻疯病和帕金森氏病共同调节蛋白抗体英文名称:PACRG 0.2ml

  环指蛋白131抗体英文名称:RNF131 0.2ml

  磷脂酶A2激活蛋白抗体英文名称:Phospholipase A2 activator protein 0.1ml

  胸苷磷酸化酶抗体英文名称:thymidine phosphorylase 0.1ml

  piwi样2蛋白抗体英文名称:Piwil2 0.2ml

  早老素蛋白-2抗体英文名称:presenilin 2 0.1ml

  组蛋白赖氨酸去甲基化酶PHF8抗体英文名称:PHF8 0.2ml

  坏死因子受体相关蛋白2抗体英文名称:TRAP2 0.2ml

  蛋白酶调解因子7抗体英文名称:PSMD7 0.2ml

  磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体英文名称:phospho-AMPK beta 1 (Ser182) 0.1ml

  磷酸化增殖细胞核抗原抗体英文名称:phosphos-PCNA (Tyr211) 0.1ml

50T黄热病毒(YFV)PCR检测试剂盒大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)颗粒 Tryptose Soya Agar 300ml/袋*10

改良马丁培养基颗粒 Martin Medium, Modified 300ml/袋*10

沙氏葡萄糖液体培养基颗粒 Sabouraud’s Glucose Broth Medium 300ml/袋*10

沙氏葡萄糖琼脂培养基颗粒 Sabouraud’s Glucose Agar Medium 300ml/袋*10

月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)颗粒 Lauryl Sulfate Tryptose Broth 300ml/袋*10

煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB)颗粒 Brilliant Green Lactose Bile Broth 300ml/袋*10

乳糖胆盐发酵培养基颗粒 Lactose Bile Broth 300ml/袋*10

结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)颗粒 Violet Red Bile Agar 300ml/袋*10

亚硒酸盐胱氨酸增液(SC)颗粒 Selenite Cystine Broth 300ml/袋*10

四硫磺酸盐煌绿增液基?。?/span>TTB)颗粒 Tetrathionate Broth Base 300ml/袋*10

Baird-Parker琼脂基础颗粒 Baird-Parker Agar Base 300ml/袋*10

7.5%氯化钠肉汤颗粒 7.5% Sodium Chloride Broth 225ml/袋*10

孟加拉红培养基颗粒 Rose Bengal Medium 300ml/袋*10

注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

 


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