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  • 产品名称:50T河弧菌(VF)核酸定性检测试剂盒

  • 产品型号:BH-P64258
  • 产品**:博湖
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简单介绍:
50T河弧菌(VF)核酸定性检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
详情介绍:

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

50T河弧菌(VF)核酸定性检测试剂盒

50T

BH-P64258

它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。


实验方法步骤:

方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(*好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
Alexa Fluor 647标记的兔抗小鼠k链Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 647 0.1ml

  PE-Cy5.5标记的兔抗小鼠k链Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy5.5 0.1ml

  FITC标记的兔抗小鼠IgG-FcRabbit Anti-mouse IgG-Fc/FITC 0.1ml

  辣根过氧化物酶标记的兔抗小鼠k链Rabbit anti-mouse Kappa light chain/HRP 0.1ml

  PE-Cy3标记的兔抗猴IgMRabbit Anti-Monkey IgM/PE-Cy3 0.1ml

  PE-CY5标记的兔抗猴IgMRabbit Anti-Monkey IgM/PE-CY5 0.1ml

  PE-Cy5.5标记的兔抗长爪沙鼠IgGRabbit anti-MG IgG/PE-Cy5.5 0.1ml

  PE-Cy3标记的兔抗长爪沙鼠IgGRabbit anti-MG IgG/PE-Cy3 0.1ml

  PE-CY5标记的兔抗长爪沙鼠IgGRabbit anti-MG IgG/PE-CY5 0.1ml

  PE-Cy7标记的兔抗长爪沙鼠IgGRabbit anti-MG IgG/PE-Cy7 0.1ml

  Alexa Fluor 488标记的羊抗小鼠IgMGoat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 488 0.1ml

  Alexa Fluor 555标记的羊抗小鼠IgMGoat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 555 0.1ml

  PE-Cy5.5标记的羊抗小鼠IgMGoat Anti-Mouse IgM/PE-Cy5.5 0.1ml

  PE-Cy5.5标记的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/PE-Cy5.5 0.1ml

  PE-Cy7标记的羊抗小鼠IgMGoat Anti-Mouse IgM/PE-Cy7 0.1ml

50T河弧菌(VF)核酸定性检测试剂盒木犀草素;Luteolin CAS 491-70-3 订购|咨询  规格: 20mg

萝卜素;Sulforaphane CAS 4478-93-7 订购|咨询  规格: 20mg

克班宁;Crebanine CAS 25127-29-1 订购|咨询  规格: 20mg

4-甲氧基水杨酸;4-Methoxysa CAS 2237-36-7 订购|咨询  规格: 20mg

菊苣酸;Cichoric acid CAS 70831-56-0 订购|咨询  规格: 20mg

环氧泽泻烯;Alismoxide CAS 87701-68-6 订购|咨询  规格: 20mg

告庭;Caudatin CAS 38395-02-7 订购|咨询  规格: 20mg

红柿碱;Tomatine CAS 17406-45-0 订购|咨询  规格: 10mg

二苯乙烯苷;tetrahydroxyl CAS 82373-94-2 订购|咨询  规格: 20mg

大果桉醛B;Macrocarpal B CAS 142698-60-0 订购|咨询  规格: 10mg

丹酚酸A;Salvialic aci CAS 96574-01-5 订购|咨询  规格: 20mg

草质素苷;Rhodionin;Herba CAS 85571-15-9 订购|咨询  规格: 20mg

穿琥宁;Kalii Dehydrogra CAS  订购|咨询  规格: 20mg

白桦脂醛;Betulinicaldehy CAS 13159-28-9 订购|咨询  规格: 20mg

表没食子儿茶素;(-)-Epigallo CAS 970-74-1 订购|咨询  规格: 20mg

磺胺二甲;纯品型;标准品;有证书 CAS 57-68-1 订购|咨询  规格: 0.1g

注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

 


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