咨询电话：18117197628
细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。
英文简称
规格
货号
HFL
1×106
P-X10435
产品详情：
细胞别称；HFL-1; HFL 1; Human fetal lung fibroblast 1; HFL；人胚肺成纤维细胞
种属来源；人
年龄性别；男；胎儿
组织来源；肺
生长特性；贴壁生长
细胞形态；成纤维细胞样
细胞代数；10代以内
背景介绍；正常胎儿肺成纤维细胞，核型正常，HFL-1细胞为有限细胞系。
STR位点；Amelogenin:X；CSF1PO:10；D13S317:8；D16S539:9,11；D18S51:15；D21S11:31.2,32.2；D3S1358:15,17；D5S818:11,12；D7S820:11；D8S1179:12,14；FGA:21,24；PentaD:9,14；PentaE:21；TH01:6,9；TPOX:8；vWA:16
生物等级；1
细胞规格；1x106cells/T25或1mL冻存管
支原体检测；无
保藏机构；ATCC; CCL-153 BCRC; 60299 ECACC; 89071902；中国科学院分子细胞科学
培养基；F12K+10% FBS+PS
培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件；无血清冻存液，液氮储存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：
1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜
。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10?~1×10?个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10?~1×10?个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
实验原理：
公司正在出售的产品：
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转录因子相互作用蛋白1抗体 Anti-TTI1 |
抑基因SSDP2抗体 Anti-SSBP2 |
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c-Myc应答蛋白抗体 Anti-RCL/c Myc responsive |
红细胞磷脂酰肌醇聚糖A抗体 |
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磷酸化谷氨酸受体1抗体 Anti-Phospho-NMDAR1(Ser897) |
长链脂肪酸延长酶ELOVL4抗体 |
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血管内皮生长因子受体2抗体 Anti-VEGFR2/FLK1 |
Rabbit Anti-Human IgA / PE-Cy3 |
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PIGA |
PE-Cy3标记的兔抗人IgA |
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卷曲螺旋结构域蛋白6抗体 |
蛋白酶体PSMα2抗体 Anti-Proteasome 20S alpha 2 |
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CCDC6 |
胞粘蛋白1抗体抗体 Anti-Cytohesin 1/PSCD1 |
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血栓素A2受体抗体 Anti-TXA2R |
ELOVL4 |
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大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)elisa生化检测试剂盒 |
锌指脂蛋白217抗体 Anti-ZNF217 |
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3-βD glucosidase ELISA Kit |
谷氨酸受体NMDAζ1抗体 Anti-NMDA epsilon 1 |
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人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)elisa生化检测试剂盒 |
环指蛋白11抗体 Anti-RNF11 |
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sPLA2ELISAKit |
互养蛋白2抗体 Anti-Syntrophin-2 |
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甘氨酸含量测试盒 |
糖原含量测试盒 |
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正常大鼠（Sprague Dawley）肝组织微粒体组分（5 毫克/毫升） |
HFL1（人胚肺成纤维细胞）大鼠维生素D2(VD2)elisa检测试剂盒 |
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MGEA5抗体 |
1号染色体开放阅读框183抗体 |
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MGEA5 |
C1orf183 |
实验步骤：
1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。