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  • 产品名称:HT-29人结肠癌细胞

  • 产品型号:P-X10099
  • 产品**:派瑞曼
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简单介绍:
HT-29人结肠癌细胞公司正在出售的产品:NCI-H2342细胞 NCI-H1944人非小细胞肺癌细胞 NCI-H1435 人肺腺癌细胞 MOLT-4人白血病细胞小鼠杂交瘤细胞;HB Hepama-1(HP-1)
详情介绍:

HT-29人结肠癌细胞


英文简称

规格

货号

TUHR10TKBTUHR10TKB

1×106

P-X10099

产品详情:


细胞别称;HT 29; HT29;HT-29;人结肠癌细胞

种属来源;人

年龄性别;女;44

组织来源;结肠

生长特性;贴壁生长

细胞形态;上皮细胞样

细胞代数;10代以内

特别注意;该细胞贴壁及展开较慢,24h后有部分细胞依然有一部分细胞未展开贴壁属于正常现象,传代后24- 48h内尽量不要移动

背景介绍;HT-29细胞系由J.Fogh1964年用移植培养方法和含15%FBSF12培养液从原发性肿瘤分离。近来,已建株的培养细胞用含血清McCoy’s 5A培液培养。该细胞系在裸鼠中致瘤,也能在类固醇处理的地鼠中致瘤。

STR位点;AmelogeninX;CSF1PO11,12;D13S31711,12D16S53911,12;D18S5113D19S43314;D21S1129,30;D2S13381923;D3S135815,16.3;D5S81811,12;D7S82010;D8S11791016;FGA2022;TH016,9;TPOX8,9vWA17,19;

染色体;64~69

倍增时间;~36-60 hours

致瘤性;Yes, in nude mice; forms well differentiated adenocarcinoma consistent with colonic primary (grade I); tumors also form in steroid treated hamsters.

受体表达情况;human adrenergic alpha2A, urokinase receptor (u-PAR), vitamin D (moderate expression), urokinase receptor (u-PAR); vitamin D (moderate expression), human adrenergic alpha2A

基因表达情况;secretory component of IgA; carcinoembryonic antigen (CEA); transforming growth factor beta binding protein; mucin, myc+; ras+; myb+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, Blood Type A; Rh+; HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, HT-29 cells are negative for CD4, but there is cell surface expression of galactose ceramide (a possible alternative receptor for HIV).

细胞规格;1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测;无

保藏机构;ATCC; HTB-38 BCRJ; 0111 CCLV; CCLV-RIE 0960 DSMZ; ACC-299 ECACC; 91072201;中国典型培养物保藏中心细胞库

培养基;90%5A+10% FBS+PS

培养条件;气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃

冻存条件;无血清冻存液,液氮储存

干冰运输及复苏好存活细胞

(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理:
1)收到细胞后,75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备DMEM培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二.细胞处理:

1)冻存细胞的复苏::将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 
3、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例:
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10?~1×10?个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10?~1×10?个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理:


实验步骤:


1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上,利用293T细胞进行慢病毒包装,获得含目的基因的慢病毒;
2 转染前24 h进行细胞铺板,转染时细胞密度控制在80%左右;
3 天加入适量病毒悬液感染细胞,并置于37 ℃,5% CO2培养箱中孵育;
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基,并继续培养;
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养,直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%,获得稳转细胞系。

公司正在出售的产品:

小鼠Wnt-10b蛋白(WNT10B)elisa生化检测试剂盒

土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)测试盒

蛋白杂交封闭溶液

NF-kappa-B抑制子beta抗体

/酵母菌ATP生物发光法定量检测试剂盒

巨噬细胞炎性蛋白16抗体

F-12营养培养基 500ml

PKN2

IkB beta

蛋白激酶N2抗体

α1微球蛋白抗体

大鼠球蛋白A(IgA)elisa检测试剂盒免费代测

Alpha 1 microglobulin

3-OMD高效液相色谱电化学定量检测试剂盒

小鼠硬骨素(SOST)elisa检测试剂盒

CCL16/LEC

辣根过氧化物酶标记的羊抗豚鼠IgG H&L

辣椒素受体5抗体  Anti-TRPV5

Goat Anti-Guinea Pig IgG H&L / HRP

细胞色素b245轻链抗体  Anti-p22-phox/Cytochrome b245 Light Chain

泛素特异性蛋白酶50抗体

卷曲螺旋结构域蛋白139抗体  Anti-PUS10/CCDC139

USP50

磷酸化酪氨酸蛋白激酶Fyn/同步原基因抗体  Anti-phospho-SLK/FYN (Tyr530)

犬白介素4(IL-4)elisa生化检测试剂盒

小鼠肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)elisa生化检测试剂盒

IL-4 ELISA Kit

HT-29人结肠癌细胞CK-MMELISAKit

猴子α1微球蛋白(α1-MG)elisa生化检测试剂盒

人肺炎衣原体(Cpn)抗体(IgG)elisa生化检测试剂盒

α1-MG ELISA Kit

HumanChlamydiapneumoniae(Cpn)antibody(IgG)ELISAKit


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