咨询电话：18117197628
细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。
英文简称
规格
货号
CAKI-2:CAKI2
1×106
P-X683
产品详情：
细胞别称：CAKI-2; CaKi-2; caki-2; CAKI 2; Caki 2; Caki2; CAKI2
种属来源：人
年龄性别：男；69岁
组织来源：肾透明细胞癌
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
背景简介：Caki-2细胞源自一位69岁白人男性的初期肾腺癌组织。
生物等级：1
细胞规格：1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测：无
基因表达情况：
保藏机构：ATCC; HTB-47 DSMZ; ACC-54 ECACC; 93120819
培养基：McCoy’s 5A+10% FBS+PS
培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
倍增时间：
STR鉴定位点Amelogenin：X，Y；CSF1PO：10，12；D13S317：10；D16S539：9，13；D18S51：17；D19S433：13，14；D21S11：27，31；D2S1338：17，20；D3S1358：14；D5S818：11；D7S820：12；D8S1179：10；FGA：22；TH01：6；TPOX：9，11；vWA：16，17；
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：
1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜
。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10?~1×10?个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10?~1×10?个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
实验原理：
公司正在出售的产品：
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E3泛素连接酶NEDD4结合蛋白2抗体 |
核转录因子κB抑制作用Ras样2蛋白抗体 |
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N4BP2 |
辣椒素受体3抗体 Anti-TRPV3 |
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3号染色体开放阅读框49抗体 |
C8orf45 |
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C3orf49 |
8号染色体开放阅读框45抗体 |
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磷酸化突触后密度蛋白93抗体 Anti-Phospho-PSD93 (Tyr340) |
NKIRAS2 |
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B细胞白血病前体蛋白转录因子3抗体 Anti-PBX3 |
phospho-PRKCQ (Ser676) |
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滑膜肉瘤X染色体相关2抗体 Anti-SSX2/CT5.2 |
二肽氨基肽酶3抗体 |
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磷酸化蛋白激酶C theta抗体 |
DPP3 |
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大鼠癌胚抗原(CEA)elisa分析检测试剂盒 |
磷酸化赖氨酸缺陷型蛋白激酶1抗体 Anti-Phospho-WNK1(Thr60) |
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CEA ELISA Kit |
神经营养因子HNT抗体 Anti-Neurotrimin/HNT |
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人踝蛋白(talin)elisa分析检测试剂盒 |
环指蛋白75抗体 Anti-ROC1/RNF75 |
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HumantalinELISAKit |
神经肌肉接头蛋白SNTA1抗体 Anti-Syntrophin/SNTA1/Syntrophin Alpha1 |
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小鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa检测试剂盒 |
载玻片细胞IGF 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
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快速SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 30-50T |
CAKI-2人肾透明细胞癌绵羊白介素2(IL-2)elisa分析检测试剂盒 |
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附睾特异蛋白9抗体 |
β细胞素抗体 |
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LCN9 |
Beta cellulin |
实验步骤：
1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。