需自备的仪器和用品：

高效液相色谱仪、示差折光检测器、低速离心机、溶剂抽滤装置、超声波清洗器、针头式过滤器（水系，50个，0.22μm）、滤膜（水系1个，0.45μm）、

钙柱（Carbomix Ca-NP10，7.8 ×300 mm）、可调式移液器、样品瓶（50个，2mL）、超纯水。

优点如下：

1、快速简便：操作时间短，48-50T，可测40例样本左右，96-100T,可测80例样本左右；

2、取样量微：常规操作取样量50l， 酶标仪操作仅需5l即可检测，部分试剂盒取样多少请；

3、稳定性好：试剂盒2～8℃存放3个月有效；

4、再现性好：20倍稀释线性仍然良好；

5、回收试验： X =99%；

6、受外界影响因素?。焊扇乓蛩厣?，重复性强；

7、测试面广：可测动物血清(浆)、组织、各种体液、灌流液、各种培养细胞以及细胞培养上清液等，部分试剂盒适用于检测植物。

测定步骤：

1.加样

1. 除包被外都需45度加样

2.加样体积要准确

3.管底加样，不能加在管壁上

4.加样时不能产生气泡

2.温浴

1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。

2.各ELISA板不应叠在一起。

3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。

4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。

3.洗涤

1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。

2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。

4.读板

1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。

2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。

优点如下：

1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。

2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。

3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。

4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。

5、再现性好：变异系数CV=1.7%。

6、回收试验： X =103.3%。

7、受外界影响因素?。焊扇乓蛩厣?，重复性强。

8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。

双料月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）  250g　PRTFDC1 抗體, 兔多抗 ELISA    400 μg

**液中和肉汤 Disinfectant Neutralization Broth 250g　CALCA / CGRP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 μg

卵磷脂吐温稀释液 Lecithin polysorbate(LP)diluent 250g　Actopaxin 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 μg

A-1培养基 A-1 Medium 250g　Actopaxin 抗體, 兔多抗 ELISA    400 μg

M-Endo肉汤 M-Endo Broth 250g　Tubulin folding cofactor A 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 μg

CCFA琼脂基础 CCFA Agar Base 250g　Actopaxin 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB   IP   50 μg

双料乳糖胆盐发酵培养基 Double Lactose Bile Medium 250g　CFHR2 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 μg

肠道增肉汤 Mossel-Enterobacteriaceae Enrichment Broth 250g　ING5 抗體, 兔單抗 ELISA   WB   IP   50 μg

MSA培养基 MSA Medium 250g　ING5 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB    50 μg

琼脂培养基F(紫红胆盐葡萄糖琼脂) Agar Medium F(Violet Red Bile Glucose Agar) 250g　ING5 抗體, 兔多抗 ELISA    400 μg

肠道富集肉汤培养基（USP） Enterobacteria Enrichment Broth-Mossel 250g　ABHD14B 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   IHC-P    50 μg

革兰氏阴性增液 Gram Negative Bacteria Enrichment Broth 250g　ABHD14B 抗體, 兔單抗 WB   IP    50 μg

大肠杆噬体MS2液体培养基 Coliphage MS2 Liquid Medium 250g　BLOC1S2 / BLOS2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 μg

糜蛋白酶测试盒Layilin  透明质酸受体抗体规格: 0.1ml

LAIR-2/CD306  白  相关球蛋白样受体2抗体规格: 0.1ml

LC3B/MAP LC3β/MAP1A  自噬微管相关蛋白轻链3抗体规格: 0.1ml

LC3 α/MAP1A/MAP LC3 Alpha/Beta  自噬微管相关蛋白轻链3抗体规格: 0.1ml

LASS1  长寿相关基因lASS1抗体规格: 0.2ml

phospho-MAP1LC3A(Ser12)  磷酸化自噬微管相关蛋白轻链3抗体规格: 0.1ml

LASS2  肿瘤转移抑制基因1抗体规格: 0.2ml

LASS3  长寿相关基因lASS3抗体规格: 0.2ml

LASS4  长寿相关基因lASS4抗体规格: 0.2ml

LASS5  长寿相关基因lASS5抗体规格: 0.2ml

LASS6  长寿相关基因lASS6抗体规格: 0.2ml

LCAT  卵磷酯胆固醇?；泼缚固骞娓? 0.2ml

LATS1  肿瘤抑制基因LATS1抗体规格: 0.2ml

注意事项：

①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

②使用干净的塑料容器配置洗涤液。

③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。

⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。