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  • 产品名称:内源性亲和素封闭液

  • 产品型号:BH-D85690
  • 产品厂商:派瑞曼
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简单介绍:
内源性亲和素封闭液公司相关热销产品:猪血管内皮细胞生长因子A(VEGF-A)ELISA试剂盒 小鼠糖皮质**受体α(GR-α)ELISA 试剂盒 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)ELISA 试剂盒 人单纯疱疹病毒Ⅰ型抗体(HSVⅠ-Ab)ELISA 试剂盒
详情介绍:

操作步骤:

A:组织中提取

1.收集 0.1g 组织,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上用组织研磨器或匀 浆管研磨。

2.将匀浆后样品转移至 1.5ml 离心管中,11000rpm 5min,吸弃上清保留沉淀。

3.至步骤 2。

B:细胞中提取

1.收集约 10 8个细胞,3000rpm 5min(悬浮细胞直接离心,贴壁细胞使用细胞刮刀或胰蛋白酶消化离心收集 均可。注意用预冷 PBS 清洗残留培养基和胰蛋白酶等),吸弃上清。

2.至步骤 1。

步骤 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上孵育 30min(每 10min 用移液枪 吹打一次),4°C 11000rpm 离心 5min,弃上清。

步骤 2:于上述步骤离心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 涡旋一次),4°C 11000rpm 离心 5min,吸取上清于一新离心管中。

步骤 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步骤离心管中,用移液枪轻轻吹匀。

步骤 4:使用 BCA 定量试剂盒定量。

步骤 5:于步骤 3 离心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,轻轻吹匀,并应用于下游研究。

产品简介:

产品名称

规格

检测方法

适用样本

保存温度

货号

内源性亲和素封闭液

100ml

2-8℃

BH-D85690

自备仪器和试剂耗材:

仪器准备:

1.离心机

2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备: 

1.PBS 缓冲液 

2.蛋白定量试剂盒
耗材准备: 

1.离心管

2.吸头
3.一次性手套

使用方法:
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。本公司产品仅用于科研实验。
注意事项:
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

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