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  • 产品名称:A431(A-431)人表皮癌细胞

  • 产品型号:P-X645
  • 产品**:派瑞曼
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简单介绍:
A431(A-431)人表皮癌细胞公司正在出售的产品:A3人T细胞白血病细胞悬浮细胞母细胞样A3:A3人细胞系组织来源:T细胞白血病,T细胞组蛋白H3-T11磷酸化检测试剂盒小鼠5-羟色胺(5-ht)elisa检测试剂盒
详情介绍:

A431(A-431)人表皮癌细胞


英文简称

规格

货号

A431(A-431):A431A431

1×106

P-X645

产品详情:


细胞别称:A431; A431/P;人表皮癌细胞

种属来源:人

年龄性别:女性,85

组织来源:皮肤

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

背景简介:皮肤癌细胞株A-431源自一位85岁女性,是D.J.Giard等人建立的一系列细胞株中的一株。它在抗胸腺细胞球蛋白、血清处理的NIH 瑞士小鼠中形成类似于恶性黑素瘤的快速增长的皮下肿瘤,在普通成纤维细胞和琼脂上形成克隆。这是一个超三倍体人细胞株。

生物等级:1

细胞规格:1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测:无

基因表达情况:

保藏机构:ATCC; CRL-1555 ATCC; CRL-7907BCRC; 60161 BCRJ; 0032 DSMZ; ACC-91 ECACC; 85090402

培养基:90%DMEM+10% FBS+PS

培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃

冻存条件:无血清冻存液,液氮储存

倍增时间:~80-100小时

STR鉴定位点AmelogeninX;CSF1PO1112;D13S3179,13;D16S53912,14D18S5113,17;D19S43315,15.2D21S1128;D2S13381720;D3S135814,20;D5S81812,13;D7S82010;D8S117913;FGA20TH019;TPOX11;vWA15,17;


干冰运输及复苏好存活细胞

(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。


细胞接收后的处理:
1)收到细胞后,75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备DMEM培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二.细胞处理:

1)冻存细胞的复苏::将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 
3、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例:
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10?~1×10?个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10?~1×10?个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理:


实验步骤:


1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上,利用293T细胞进行慢病毒包装,获得含目的基因的慢病毒;
2 转染前24 h进行细胞铺板,转染时细胞密度控制在80%左右;
3 天加入适量病毒悬液感染细胞,并置于37 ℃,5% CO2培养箱中孵育;
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基,并继续培养;
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养,直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%,获得稳转细胞系。

公司正在出售的产品:

NOC2家族样蛋白抗体

E3泛素蛋白连接酶MIB1抗体

NOC2L

p53靶蛋白3抗体  Anti-TP53TG3

9号染色体开放阅读框135抗体

Duck hepatitis A virus polyprotein

C9orf135

鸭甲型肝炎病毒聚蛋白/鸭肝炎病毒抗体

RAS癌基因家族蛋白RAB40C抗体  Anti-RAB40C

Mib1

2型神经纤维瘤抗体  Anti-NF2/Neurofibromin 2

TRAP220

神经生长因子诱导蛋白抗体  Anti-VGF/Nerve growth factor inducible

线粒体核糖体蛋白S14抗体

甲状腺受体相关蛋白220抗体

MRPS14

Cy3标记小鼠IgG(型对照)

硫酸软骨素多糖核心蛋白抗体  Anti-SRGN

Mouse IgG / Cy3

末端多聚腺苷酸1蛋白抗体  Anti-OGFOD1

跨膜蛋白76/TMEM76抗体

抑癌蛋白DLP1抗体  Anti-PDSS2

HGSNAT

胰蛋白酶抑制剂抗体  Anti-Trypsin Inhibitor/CRISP8

大鼠胱天蛋白酶7(CASP7)elisa分析检测试剂盒

兔白介素12(IL-12/P70)elisa分析检测试剂盒

CASP7 ELISA kit

A431(A-431)人表皮癌细胞IL-12/P70ELISAkit

球蛋白超家族成员22抗体

19号染色体开放阅读框73抗体

IGSF22

C19orf73

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